Page 9 - No28

MŰSZERES KÉMIAI VIZSGÁLATOK

által meghatározott vizsgálatokra
HOGYAN MŰKÖDIK?
alkalmas.
A kromatográfiás analitikai módszer
lényege, hogy egy anyag-keveréket NAGYNYOMÁSÚ
bejuttattunk egy kromatográfiás
rendszerbe, amely mindig egy FOLYADÉK-
állófázisból és egy mozgófázisból KROMATOGRÁFIA (HPLC)
áll. A mozgófázis próbálja szállítani A leggyakrabban alkalmazott
a vegyületkeveréket, de az kromatográfiás módszer a nagynyomású
egyes komponensek különböző
erősségű kölcsönhatásba lépnek folyadékkromatográfia (HPLC, az angol
az állófázissal, amely mozgásukat High Performance Liquid
lelassítja. Minél erősebb az Chromatography rövidítése). Mivel a
egyes anyagok kölcsönhatása kromatográfiás oszlopban 1 – 5
az állófázissal annál lassabban
haladnak. Ezért a mozgófázishoz mikrométeres szemcsék vannak, a
viszonyított sebességet retenciós gyorsabb elválasztás érdekében a
faktornak nevezzük. A mintában mozgófázist nagynyomású pumpa
lévő komponensek szétválását segítségével nyomjuk át az oszlopon. A
a kromatográfiás rendszerben
történő sebességük különbsége nagynyomású folyadékkromatográfiás
okozza. Az oszlopon történő készülék fontos részei a mozgófázis
áthaladásuk ideje, az úgynevezett tartályok, gázmentesítő vákuum pumpa,
retenciós idő, különböző lesz, az egyenletes mozgófázis áramlási
megkönnyítve ezáltal a komponensek
azonosítását, az oszlop végén sebességét biztosító piszton pumpa
elhelyezkedő detektor számára. A rendszer, injektor és automata
retenciós idő természetesen függ mintaadagoló, a termosztátba helyezett
az oszlop hosszától, átmérőjétől kromatográfiás állófázist tartalmazó
és a mozgófázis sebességétől
is. A mozgófázis halmazállapota oszlop, és a detektor, ami folyamatosan
alapján, megkülönböztetünk méri a mozgófázis UV elnyelését. A
folyadékkromatográfiát, és készüléket egy komputer irányítja. A elválasztás mechanizmusa szerint
gázkromatográfiát. Az álló software segítségével meghatározzuk, adszorpciós és megoszlásos
és mozgófázis alakja alapján,
vékonyréteg-kromatográfiáról hogy mennyi mintát és melyik üvegcséből kromatográfiát különböztethetünk meg.
beszélünk, amikor az állófázist egy injektáljon a készülék, milyen összetételű Az adszorpciós kromatográfiát fedezték
finom rétegre visszük fel, amelyet és áramlási sebességű mozgófázist fel először, amikor az álló fázis
folyadékba mártva a kapilláris erők szeretnénk alkalmazni. A software gyűjti a polárosabb, mint a mozgófázis, többnyire
hatására a folyadék mozgó fázissá
alakul. Amennyiben az állófázist detektor jelet és beállíthatjuk, hogy nagy felületű aprószemcsés, akár 1
egy oszlopba vagy kapillárisba milyen hullámhosszon akarjuk mérni az mikrométeres, de többnyire 3 vagy 5
töltjük, a mozgófázist (folyadék anyagok koncentrációval arányos mikrométeres szemcsék alkotják. Ilyenkor
vagy gáz) állandó sebességgel elnyelését. Miután az egyes komponensek a mozgófázis többnyire szerves oldószer.
kell átáramoltatni az állófázison,
pumpával vagy nyomással. leoldódtak, eluálódtak az oszlopról, a
rendszer újabb minta analízisére válik ADSZORPCIÓS (NORMÁL
idő függvényében. Az alkalmazott alkalmassá. FÁZISÚ) KROMATOGRÁFIA
detektorok olyan eszközök, amelyek az A kromatográfiás analízis eredménye a A polárosabb vegyületek erősebben
oszlopról leváló komponensekre azok kromatogram, amely a detektor jel tapadnak (vagy kötődnek) az állófázishoz,
anyagmennyiségével vagy ábrázolása az idő függvényében. Amikor mint a kevésbé polárosok. Minél
koncentrációjával arányos jelet nem halad át anyag, csak a mozgófázis, az polárosabb a mozgófázis, annál nagyobb a
szolgáltatnak. az alapvonal. Amikor az egyes képessége, hogy magával vigye a minta
A különböző detektorok a molekulák komponensek elhagyják a kromatográfiás komponenseit, mozgás közben leoldja,
optikai, elektrokémiai, rendszert és megjelennek a detektorban a eluálja azokat a szilárd fázistól.
hővezetőképességi, vagy fluoreszcencia, jel egy csúcs alakot formál. A csúcsok Ez a fajta kromatográfiás mechanizmus
tulajdonságainak mérésére alapozottak. száma elárulja, hogy hányféle molekulából kiválóan alkalmas nem poláris anyagok
Minden detektortípus egyedi állt a minta. A csúcsok nagysága (a görbe szerkezeti izomerjeinek az elválasztására.
képességekkel rendelkezik, és az analitok alatti terület) a molekulák mennyiségével Hátránya azonban, hogy nehezen
természetétől, valamint az analízishez arányos. Az egyes komponensek reprodukálható, sokáig áll be az egyensúly
szükséges érzékenység és szelektivitás állófázissal való kölcsönhatása, azaz az az álló és mozgófázis között, nem lehet

KÉMIAI PANORÁMA 28. SZÁM, 2024. ÉVFOLYAM 9