Page 24 - No8

IMMUNFESTÉS

Immunfehérjék akcióban

Folytatás a 23. oldalról tet. Tapasztalat szerint a direkt
immunhisztokémia, amikor a primer anti- A kémia ebben az
jelenleg is egy biológiai folyamatot haszná- testre kémiailag festéket vagy enzimet esetben is hasznos
lunk, ez az immunválasz és innen ered az viszünk fel, nem elég érzékeny ahhoz, hogy eszközöket ad a kutató
immunfestés elnevezés. A keresett fehérjét, valóban láthatóvá tegyük a fehérjét mikro-
vagy annak egy darabját állatok, praktikus szkópos elemzés számára. Ezért további erő- orvosok, biológusok kezébe
szempontokból elsősorban nyúl vagy egér sítési lépések beiktatására van szükség,
szervezetébe juttatják. melyek közül a következőt alkalmazzák leg-
Az állat immunrendsze- gyakrabban: a például másik faj, leggyakrabban
re felismeri a számára nyúlban termelt primer kecske szervezetébe juttatják. Ennek
idegen fehérjét, és antitestet, illetve annak hatására a kecskében olyan antitest kép-
immunválasz keretében egy, az eredeti fehérje ződik, ami hozzá tud kötődni a nyúl által
néhány hét alatt kiter- felismerésében nem termelt elsődleges antitesthez. Mivel a
meli az arra specifikus résztvevő darabját egy kecskében termelt antitestet másodszor
antitestet, egy immun- alkalmazzuk, azt másodlagos antitestnek
globulin fehérje moleku- is nevezzük az immunfestés
során. Erre a másodlagos
antitestre kémiai reakcióval
vagy fényben világító, fluo-

reszcens kismolekulájú festéket, vagy enzi-
lát, amit utána a vérből tisztítással nyerünk met kötnek. Az enzim kiválasztásakor a leg-
ki. fontosabb szempont az, hogy az általa katali-
Ezek után már csak arra van szükség, hogy zált reakcióban részt vevő vegyületek vízben
az antitestet láthatóvá tegyük. Ez nem köny- oldódva színtelenek legyenek, azonban az
nyű, hiszen általában nagyon kis mennyiségű enzim jelenlétében bekövetkező specifikus
fehérjét kell úgy kimutatnunk, hogy közben a kémiai reakció révén vízben nem oldódó, szí-
szövet struktúrája ne változzon meg (az nes vegyület képződjön. Így a reakciótermék
immunfestés egy rokon módszere az úgyne-
vezett western blot technika, amivel kisebb
mennyiségű fehérjét is ki lehet mutatni,

A

).
).
A
szövet-
viszont a szövet struktúrája elvész). A szövet--
elvész
szövet
szele

10-50
10-50
ből általában vékony, 10-50 �m vastag szele-szele--
,

m
vastag
vastag
�
�
m
tet vágunk, és ehhez öntjük hozzá az antites-
Antitestek előállítása és felhasználása
24 8. SZÁM, 2012. ÉVFOLYAM 1. SZÁM KÉMIAI PANORÁMA
24 4. SZÁM, 2010. ÉVFOLYAM 2. SZÁM KÉMIAI PANORÁMA